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產品詳情
  • 產品名稱:小鼠胚胎成骨細胞前體細胞

  • 產品型號:MC3T3-E1
  • 產品廠商:KALANG
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簡單介紹:
小鼠胚胎成骨細胞前體細胞從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。MC3T3亞克隆4(ATCC CRL-2593)和MC3T3亞克隆14(ATCC CRL-2594)在抗壞血酸和3到4mM無機磷酸鹽中生長表現出高水平的成骨細胞分化。它們10天后形成一個礦化良好的細胞外基質(ECM)。MC3T3亞克隆24(ATCC CRL-2595)和MC3T3亞克隆30(ATCC CRL-2596)在抗壞血酸中生長表現出很差的成骨細胞分化。不形成ECM,可以作為亞克隆4和14的陰性對照。礦化的亞克隆選擇的表達作為成骨細胞標記的mRNA,及唾液酸糖蛋白(BSP),骨鈣素(OCN),和甲狀旁腺**/甲狀旁腺**相關蛋白受體的mRN 小鼠胚胎成骨細胞前體細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
詳情介紹:

小鼠胚胎成骨細胞前體細胞


貨號 KL-001

簡稱 MC3T3-E1

細胞數 1×106

規格 1ml/T25

價格 詢價

小鼠胚胎成骨細胞前體細胞注意事項:

1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。

詳細描述 Description


細胞介紹

從克隆的但是表型各異的MC3T3-E1細胞系中分離出一系列亞克隆。從含抗壞血酸培養基生長的成骨細胞中選擇高或低成骨細胞分化、礦化的亞克隆。MC3T3亞克隆4(ATCC CRL-2593)和MC3T3亞克隆14(ATCC CRL-2594)在抗壞血酸和3到4mM無機磷酸鹽中生長表現出高水平的成骨細胞分化。它們10天后形成一個礦化良好的細胞外基質(ECM)。MC3T3亞克隆24(ATCC CRL-2595)和MC3T3亞克隆30(ATCC CRL-2596)在抗壞血酸中生長表現出很差的成骨細胞分化。不形成ECM,可以作為亞克隆4和14的陰性對照。礦化的亞克隆選擇的表達作為成骨細胞標記的mRNA,及唾液酸糖蛋白(BSP),骨鈣素(OCN),和甲狀旁腺**/甲狀旁腺**相關蛋白受體的mRNA。高或者低的分化潛能的亞克隆在培養中生產出相似數量的膠原質,表達可比較的基本水平的mRNA編碼Osf2/Cbfa1,一種成骨細胞相關轉錄因子。植入**缺陷小鼠以后,高分化性的亞克隆形成與骨類似的形成小骨的編織骨,低分化細胞只是產生纖維組織。這些細胞系是研究體外成骨細胞分化的好模型,尤其是ECM信號。它們和原代培養顱頂成骨細胞的行為類似。

小鼠胚胎成骨細胞前體細胞

細胞特性

1)  來源:顱頂骨

2)  形態:成纖維細胞

3)  含量:>1x106 個/mL

4)  污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性

5)  規格:T75瓶或者1mL凍存管包裝


運輸和保存:使用含有上等胎牛血清的2ml凍存管發送存活細胞。收到細胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦使用的培養基后轉移至10cm培養皿或者T75培養瓶中培養,傳代達到細胞生長狀態良好時,再進行凍存。具體操作見細胞培養步驟。


細胞用途:僅供科研使用。

小鼠胚胎成骨細胞前體細胞                     

細胞培養步驟

一.培養基及培養凍存條件準備:

1) 準備MEMα+培養基(MEMα+,GIBCO,貨號11900024,添加NaHCO3 1.5g/L,肌醇 43.2mg/L, 葉酸 8.82mg/L,β-巰基乙醇 7.8mg/L),90%;上等胎牛血清,10%。

2) 培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%完全培養基,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。

二.細胞處理:

1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養瓶中培養過夜(或將細胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養基,培養過夜)。**天換液并檢查細胞密度。

2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。

對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:

1.      棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2.      加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加少量培養基終止消化。

3.      按6-8ml/瓶補加培養基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養液后吹勻。

4.      將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養基的新皿中或者瓶中。

3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,棄去培養基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。

小鼠胚胎成骨細胞前體細胞

注意事項:

1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。

2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。


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