人舌鱗癌細胞
貨號 KL-045
簡稱 CAL-27
細胞數 1×106
規格 1ml/T25
價格 詢價
注意事項:
1. 收到細胞后,若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯系。
2. 所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內操作,并請注意防護,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要**后方能丟棄。
詳細描述 Description
人舌鱗癌細胞
細胞介紹
該細胞系于1982年建立,從一位56歲白種男性的病變舌中間部分取得,該細胞具高密度顆粒狀胞漿。
細胞特性
1)來源:舌
2)形態:上皮細胞樣,貼壁生長
3)含量:>1x106 個/mL
4)污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性
5)規格:T25瓶或者1mL凍存管包裝
人舌鱗癌細胞
細胞接受后的處理:
1)收到細胞后,請檢查是否漏液,如果漏液,請拍照片發給我們。
2)請先在顯微鏡下確認細胞生長狀態,去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養約2-3h。
3)棄去T25瓶中的培養基,添加6ml本公司附帶的完全培養基。
4)如果細胞長滿(90%以上)請及時進行細胞傳代,傳代培養用6ml本公司附帶的完全培養基。
5)接到細胞次日,請檢查細胞是否污染,若發現污染或疑似污染,請及時與我們取得聯系。
人舌鱗癌細胞
細胞用途:僅供科研使用。
本公司的細胞培養操作規程,供參考
一.培養基及培養凍存條件準備:
1)準備DMEM培養基(DMEM,GIBCO,貨號11995-065),90%;上等胎牛血清,10%。
2)培養條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養箱濕度為70%-80%。
3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現用現配。液氮儲存。
二.人舌鱗癌細胞細胞處理:
1)復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養基的培養瓶中培養過夜。**天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養。
對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1.棄去培養上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養瓶中,置于37℃培養箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養瓶后加入3ml此細胞的培養基終止消化。
3.輕輕吹打后吸出,移入15ml離心管中,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養液后吹勻。
4.移入到事先準備好的含有5ml培養基的T-25培養瓶中或含有14ml培養基的T-75培養瓶中培養。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態良好時,可進行細胞凍存。貼壁細胞凍存時,先要消化處理并進行細胞計數。消化方法按照細胞傳代方法的1-3步驟進行,*后的重懸液使用血清。懸浮細胞直接計數后離心,用血清重懸浮,加DMSO至*終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數量分配到凍存管中。本公司按每個凍存管細胞數目大于1X106個細胞凍存。