HCC1937(人乳腺癌細胞)
細胞名稱:HCC1937 人乳腺癌細胞
組織來源:**;原發性導管癌
培養條件:RPMI-1640 +10% FBS
形 態:貼壁;上皮細胞樣
背 景:這株細胞1995年10月13日*初來源于原發性導管癌, 用了11.5個月建株。 腫瘤分類為TNM IIB期,3級。 BRCA1分析表明這株細胞是BRCA1 5382C 突變純合的,而來源于同一病人的類**母細胞細胞株在這個突變位點上是雜合的。另兩個家庭成員也有這個突變;一個同卵雙生姐妹也患有乳腺癌。這株細胞有一個后天的TP53突變, 而其野生型等位基因丟失;一個PTEN基因的后天的純合缺失,以及多個與乳腺癌發病機理相關的位點上發生的雜合突變。這株細胞Her2-neu和p53表達都呈陰性。HCC1937的上皮細胞特異性標志上皮細胞糖蛋2(EGP2)和細胞角蛋白19都呈陽性。雌**受體(ER)和孕酮(PR)表達陰性。
HCC1937(人乳腺癌細胞)操作說明:
1)對于常溫運輸的細胞,收到細胞后,檢查是否有運輸問題,即細胞培養瓶或管是否破損,細胞培養液是否溢出。若沒有運輸問題,請75%酒精**后,保留封口膜,放入細胞培養箱中靜置。嚴格檢查培養箱的參數:溫度,濕度和CO2濃度。細胞靜置時間一般為6-12小時后,細胞狀態穩定后,即可開始后續操作。選用正確的細胞培養體系,HCC1937(人乳腺癌細胞)嚴格按照說明書的培養條件進行培養。條件允許,培養的前三天內做細胞拍照記錄,通過郵件發送給我們做及時狀態跟蹤。
2)對于干冰運輸的細胞,請取出冷凍管后,須立即放入37C水槽中快速解凍,輕搖冷凍管使其在1分鐘內全部融化,并注意水面不可超過冷凍管蓋沿,否則易發生污染情形。然后將其復蘇培養,次日更換培養液。
HCC1937(人乳腺癌細胞)注意事項:
1)細胞漂浮:培養瓶不開封,瓶口酒精擦拭后平躺放置在培養箱。次日觀察,如細胞大部分又貼回瓶底,表明細胞活力正常,剩余漂浮的細胞可以離心去掉,留10ml培養液培養觀察,細胞生長至匯合度80%,進行消化傳代;如細胞還是不貼壁,將細胞離心收集轉到新培養瓶,原培養瓶加部分培養液繼續培養,中間注意觀察,我們的技術人員會一直跟蹤指導,直到問題解決。
2)對于生長緩慢的貼壁細胞:可采用適當的提高培養基中血清濃度,或隔日換液的方法來保證細胞的狀態和生長速度。
3)對于生長不均的貼壁細胞:在培養過程中若出現細胞分布明顯不均時(即某一區域細胞已重疊生長,而旁邊則為一塊空白),此時可將細胞進行消化,重新打散,貼壁,加入新培養基進行培養。
HCC1937(人乳腺癌細胞)下面介紹幾種細胞培養過程中常見的污染:
一)桿菌污染:培養基中加入***可以減少此種污染,但也不是**的。
二)支原體污染:傳說中的黑焦蟲,長得暴快。24小時就滿視野都是了。污染源大多數情況下是培養用血清。
三)***污染:似乎無處不在,而且頑固得很。長得暴快(12h就能在細胞上面密布)。培養液澄清。低倍顯微鏡下像黑色的沙子鋪在細胞上,高倍鏡下呈樹枝狀或葡萄狀。
四)霉菌污染、比較常見的一種污染,常常來源于污染的空氣、水和器械。