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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:人骨肉瘤細(xì)胞

  • 產(chǎn)品型號:U-2OS
  • 產(chǎn)品廠商:KALANG
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
人骨肉瘤細(xì)胞系(原名2T)是由Ponten J和Saksela E在1964年從一名15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤中分離建立的。與WI-38共培養(yǎng)或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CF法)未檢測到病毒。該細(xì)胞表達(dá)胰島素樣生長因子Ⅰ、Ⅱ(IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ)受體和骨肉瘤衍生生長因子(ODGF)。 細(xì)胞特性 1) 來源:骨肉瘤 2) 形態(tài):上皮細(xì)胞樣 3) 含量:>1x106 個/mL 4) 污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性 5) 規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝 人骨肉瘤細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
詳情介紹:

人骨肉瘤細(xì)胞

貨號 KL-013

簡稱 U-2OS

細(xì)胞數(shù) 1×106

規(guī)格 1ml/T25

價格 詢價

人骨肉瘤細(xì)胞注意事項(xiàng):

1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要**后方能丟棄。

詳細(xì)描述 Description


細(xì)胞介紹

細(xì)胞系(原名2T)是由Ponten J和Saksela E在1964年從一名15歲女孩的脛骨中等分化的肉瘤中分離建立的。與WI-38共培養(yǎng)或用抗猴空泡病毒SV40、呼吸道合胞病毒RSV或腺病毒的補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)(CF法)未檢測到病毒。該細(xì)胞表達(dá)胰島素樣生長因子Ⅰ、Ⅱ(IGF-Ⅰ、IGF-Ⅱ)受體和骨肉瘤衍生生長因子(ODGF)。


細(xì)胞特性

1)  來源:骨肉瘤

2)  形態(tài):上皮細(xì)胞樣

3)  含量:>1x106 個/mL

4)  污染:支原體、**、酵母和**檢測為陰性

5)  規(guī)格:T75瓶或者1mL凍存管包裝


運(yùn)輸和保存:使用含有上等胎牛血清的2ml凍存管發(fā)送存活細(xì)胞。收到細(xì)胞后,可在1000RPM,常溫條件下,離心5min后,于潔凈操作臺棄去上清,加入推薦使用的培養(yǎng)基后轉(zhuǎn)移至10cm培養(yǎng)皿或者T75培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),傳代達(dá)到細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,再進(jìn)行凍存。具體操作見細(xì)胞培養(yǎng)步驟。


細(xì)胞用途:僅供科研使用。

人骨肉瘤細(xì)胞                     

細(xì)胞培養(yǎng)步驟

一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:

1) 準(zhǔn)備McCoy’s 5A培養(yǎng)基(McCoy’s 5A Media,SIGMA,M4892),90%;上等胎牛血清,10%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%完全培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

二.細(xì)胞處理:

1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。**天換液并檢查細(xì)胞密度。

2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:

1.      人骨肉瘤細(xì)胞棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。

2.      加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。

3.      按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。

4.      將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。


人骨肉瘤細(xì)胞注意事項(xiàng):

1. 收到細(xì)胞后,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

2. 所有動物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級生物**臺內(nèi)操作,并請注意防護(hù),所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要**后方能丟棄。

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